المفاهيم الأساسية
DNA 손상 반응 중 Srs2의 PCNA 결합과 SUMO화가 RPA 길항작용을 촉진한다.
الملخص
DNA 손상 반응은 세포 주기 정지, 유전체 수리 등 다양한 세포 변화를 유발한다. 이후 DNA 손상 검사 경로(DNA damage checkpoint, DDC)를 하향 조절하여 세포 주기와 성장을 재개할 수 있다. 효모에서 Srs2 DNA 헬리케이스는 RPA와 관련 Mec1 검사 키나아제를 DNA에서 제거하여 Mec1 활성화를 억제함으로써 DDC 하향 조절에 기여한다. 그러나 Srs2의 '항-검사' 역할이 시간적, 공간적으로 어떻게 조절되는지는 불분명하다.
본 연구에서는 Srs2의 인산화, SUMO화, 단백질 상호작용 부위 등 조절 요소를 분석하여 RPA 조절에 관여하는 Srs2 특성을 규명하였다. 유전학적 분석과 검사 수준 평가 결과, Srs2의 RPA 길항작용은 PCNA 결합에 의해 촉진되며, SUMO화에 의해 더욱 강화된다. Srs2 SUMO화는 Mec1 활성화 최고점 이후에 정점을 이루며, Mec1에 의존적이다. 이러한 결과를 바탕으로, 검사 하향 조절이 PCNA 매개 Srs2 모집과 이후 Mec1 과활성화에 의한 Srs2 SUMO화에 의해 촉진된다는 2단계 모델을 제안한다.
الإحصائيات
Srs2 PCNA 결합 돌연변이(srs2-ΔPIM)와 SUMO화 돌연변이(srs2-3KR)는 rfa1-zm2 세포의 CPT 감수성을 개선한다.
srs2-ΔPIM과 srs2-3KR은 rfa1-zm2 세포의 Rad53 인산화 수준과 G2/M에서 G1로의 진입 능력을 향상시킨다.
Srs2 SUMO화 수준은 Mec1 활성화 최고점 이후에 정점을 이룬다.
Mec1 결실은 Srs2 SUMO화를 완전히 억제한다.
اقتباسات
"Srs2 binding to PCNA, which is known to recruit Srs2 to subsets of ssDNA regions, and Srs2 sumoylation, which we found depends on the Srs2-PCNA interaction, contribute to RPA antagonism."
"Srs2 sumoylation level peaks after Mec1 activity reaches maximal levels and that Mec1 is required for this modification."